Инструкция по применению препарата Рибонуклеза

: 20 Мар 2008 , Эволюция в тени динозавров , том 19, №1

В клетках нашего организма – сложно устроенных «химических фабриках» – постоянно происходит бесчисленное множество самых разнообразных биохимических реакций. Причем процессы деструкции, разрушения ненужных или чужеродных для клетки веществ не менее значимы для нее, чем процессы синтеза. Осуществляются они, как правило, с помощью ферментов — природных катализаторов белковой природы…

Рибонуклеиновые кислоты, которые служат матрицами для синтеза белков, являются важнейшим компонентом клеточного биохимического «производства». Однако в некоторых случаях, при инфекциях или других патологических состояниях организма, необходимо остановить процессы синтеза того или иного белка. И один из способов сделать это – разрушить соответствующую РНК с помощью специальных ферментов.

Неудивительно, что ученые начали задумываться о возможности создания на их основе принципиально новых лекарственных препаратов, способных избирательно уничтожать, например, вирусные РНК, не затрагивая при этом жизненно важные рибонуклеиновые кислоты клеток организма.

Показания к применению

Лекарственное средство рекомендовано к применению при таких заболеваниях и патологических состояниях:

Плеврит экссудативного типа
Свищи и абсцесс легкого
Недуги органов дыхания, при которых наблюдается плохое отхождение мокроты
Отит
Остеомиелит
Менингит вирусной природы
Бронхоэктатическая болезнь
Энцефалит клещевой
Синусит
Стоматологические заболевания (пародонтоз, гингивит)
Язвы трофические
Тромбофлебит
Ателактаз легкого.

Универсальные «солдаты»

Где могут найти применение искусственные рибонуклеазы? В первую очередь там, где сейчас используют природные ферменты. Например, в современной биотехнологии – при выделении геномной ДНК, при подготовке ее для ПЦР-анализа, который широко используется в самых различных областях, от медицинской диагностики до криминалистики.

Искусственные рибонуклеазы совершенно инертны по отношению к другим биомолекулам, в частности, белкам. Это их свойство оказалось незаменимым при создании вакцин. Ведь чтобы получить безопасные противовирусные вакцины, вирусные частицы надо «обезоружить», т. е. разрушить их генетический материал. Наиболее часто для этой цели в настоящее время используется формальдегид, сочетающий высокую активность с низкой стоимостью. Однако формальдегид также частично разрушает вирусные белки, а именно: на них в организме при вакцинации вырабатывается иммунный ответ. В результате эффективность вакцинации снижается. Искусственные рибонуклеазы лишены этого недостатка, что подтвердили предварительные эксперименты, проведенные на лабораторных мышах, зараженных вирусом гриппа. Выживаемость животных, получавших подобную вакцину, оказалась существенно выше по сравнению с контрольной группой, вакцинированной стандартным образом.

И наконец, искусственные ферменты могут с успехом заменить природные в исследованиях различных РНК-белковых комплексов. Например, при решении вопроса о том, чем на заре становления жизни определялась специфичность протоферментов – их РНК-связывающим определенные связи в цепочке РНК (как это наблюдается у современных рибонуклеаз) или эту функцию первоначально исполняли их каталитически активные центры? Подобные работы напрямую связаны с одой из важнейших фундаментальных эволюционных проблем – проблемой становления белковой жизни.

Лечебные свойства

Рибонуклеазу относят к числу ферментативных препаратов, основную его составляющую получают путем переработки секрета поджелудочных желез крупного скота.

Механизм действия основан на процессе деполимеризации рибонуклеиновых кислот до олигопептидов или же монопептидов.

Основная функция рибонуклеазы — разжижение чрезмерно вязкой мокроты, гноя, а также слизи. К тому же это вещество способно снимать степень выраженности воспалительного процесса.

Данное средство тормозит распространение некоторых разновидностей вирусов, содержащих РНК. Такой эффект достигается за счет активизации процесса разрушения нуклеиновых кислот.

Активность рибонуклеазы можно определить биологическим способом при учете общего числа кислоторастворимых компонентов, которые высвобождаются вследствие гидролиза РНК. Единица активности равна 1 мг рибонуклеазы.

Все гениальное – просто

Рибонуклеазы

– ферменты класса гидролаз, расщепляющие РНК, – широко распространены в клетках всех организмов. Самый известный из них – панкреатическая рибонуклеаза (или РНКаза А), выделенная из поджелудочной железы быка.

Говоря об этом ферменте, постоянно приходится добавлять слово «впервые». РНКаза А – первый ферментный белок, для которого в начале 60-х гг. прошлого века была полностью определена последовательность входящих в его состав аминокислот. А когда в 1969 г. был осуществлен первый химический синтез фермента, им оказалась все та же панкреатическая рибонуклеаза. Более того, она же стала и первым ферментом, вошедшим в медицинскую практику (его используют в качестве противовирусного средства). В качестве отступления заметим что фермент онконаза – аналог РНКазы А, выделенный из ооцитов лягушки Rana pipiens

, сегодня является абсолютно новым противораковым препаратом, явный успех клинических испытаний которого позволяет говорить о зарождении нового класса противоопухолевых препаратов – серьезной альтернативе классической химиотерапии.
Природные рибонуклеазы – ферменты, разрушающие ненужную или чужеродную (вирусную) РНК – присутствуют в клетках всех живых организмов
Следующей вехой на пути превращения рибонуклеаз в лекарства можно считать 1980-е гг., когда американский биохимик Р. Бреслоу обнаружил, что небольшие молекулы гетероциклического вещества имидазола способны расщеплять РНК подобно природной панкреатической рибонуклеазе. Ему пришла мысль, что можно создать искусственные аналоги ферментов – низкомолекулярные соединения с функциями природных катализаторов. Эта идея была гениальна в своей простоте: для достижения результата достаточно взять каталитически активные группы, встречающиеся в активных центрах природных ферментов, зафиксировать их определенным образом в пространстве – и синтетический аналог фермента готов!

Рибонуклеазы были первыми ферментами, для которых были созданы искусственные аналоги – низкомолекулярные соединения, действующие подобно белкам-катализаторам

Через несколько лет Р. Бреслоу удалось реализовать высказанную им идею на практике. И хотя полученные им «искусственные» рибонуклеазы были способны расщеплять фосфодиэфирные связи лишь в специально синтезированном для этих целей субстрате, а не в природных РНК, начало было положено.

Появление первых работ по искусственным рибонуклеазам совпало с пиком исследований по другой очень интересной тематике – так называемым антисмысловым олигонуклеотидам

, работы по которым велись велись в отделе биохимии Института общей химии СО РАН (Новосибирск), возглавляемого академиком Д.Г. Кнорре. Здесь следует пояснить, что более менее протяженные последовательности нуклеиновых кислот являются уникальными по своей структуре. Поэтому на них можно направленно воздействовать
комплементарными
(антисмысловыми) олигонуклеотидами, которые могут специфично «узнавать» и присоединяться лишь к определенным участкам конкретной нуклеиновой кислоты.

Объединение этих двух технологий – «антисмысловой» и низкомолекулярных искусственных рибонуклеаз – сулило прорыв в производстве синтетических ферментов для медицинских целей. А поскольку хорошие идеи зачастую приходят в голову многим людям одновременно, неудивительно, что работы в этом направлении в 90-х гг. прошлого века начались практически одновременно по всему миру – в Японии, Европе, Соединенных Штатах и России.

Рибонуклеаза: инструкция по применению

В случае местного использования рану или же язву следует присыпать порошком из флакона в объеме 25-50 мг. Поверх необходимо разместить марлевую салфетку, которую предварительно смочили физраствором.

Для проведения ингаляционной процедуры потребуется применять мелкодисперсный аэрозоль: на 1 процедуру берется 25 мг лиофилизата, который разводится 4 мл физраствора.

Для эндобронхиального введения потребуется взять дозу препарата 25-50 мг, процедура проводится с использованием катетера или же гортанного шприца.

Для внутриплеврального введения берут рибонуклеазу в объеме 25-50 мг, а также 5-10 мл физраствора.

В случае синуситов показана дозировка препарата 5-10 м, которую разводят 5 мл физраствора. Вводят препарат непосредственно в носовую пазуху после осуществления процедуры промывания. При отите показано введение 1 мл 0,1%-ного раствора в слуховой проход.

Процедура внутримышечного введения: на 5-10 мг препарата берется 1 мл физраствора. Лечение подразумевает осуществление нескольких инъекций — от 2 до 10 уколов (по 1 или 2 на протяжении дня).

Наивысшая единоразовая дозировка при внутримышечном введении составляет 10 мг, в случае местного введения доза препарата составляет 50 мг.

При лечении клещевого энцефалита подразумевается внутримышечное введение препарата до 6 раз на протяжении дня дозировкой 25-30 мг. Разовая дозировка для малышей в возрасте от 1 года и до 3 лет составляет 5-8 мг; 4-6 лет – дозировка лекарства 10-14 мг; возрастной группе 7-11 лет показано использовать 15-18 мг препарата; 12-15 лет – применяют 20 мг рибонуклеазы.

Перед процедурой введения инъекции нужный объем лекарственного средства следует развести 2 мл раствора прокаина 0,5%-ного.

Непосредственно перед курсом лечения следует провести кожные пробы, которые покажут чувствительность к препарату.

Не хуже природных

К сожалению, в ходе реализации антисмысловой технологии в ее первоначальном варианте обнаружился ряд проблем, в результате чего создание реальных лекарственных препаратов на основе таких соединений отодвинулось на неопределенное время. Эти проблемы касались в первую очередь проникновения синтетических олигонуклеотидных производных сквозь клеточные мембраны, а также их стабильности в живых системах.
Кроме того, на свертывание работ в этом направлении повлияла причина «нетехнологического» характера. Антисмысловая технология на начальном этапе своего становления казалась настолько легко реализуемой, что во всем мире как грибы стали появляться коммерческие фирмы, обещающие создать «панацею» уже в ближайшие годы. В эту область были инвестированы огромные средства; когда же обещанной быстрой отдачи не последовало, компании стали быстро разоряться, произошло и значительное сокращение финансирование фундаментальных исследований. Для российских ученых этот период совпал с общим развалом российской экономики, значительным сокращением финансирования науки в целом.

Аналоги природных ферментов – удобный инструмент для молекулярной биологии и генной инженерии

Когда новосибирские ученые из Института химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН начинали свою работу в области конструирования искусственных рибонуклеаз на основе олигонуклеотидных конъюгатов, они знали о всех трудностиях, хотя, как и многие в то время, считали их временными. К сожалению, идеальные носители для наших рибонуклеаз – синтетические аналоги нуклеиновых кислот, легко проникающие внутрь клеток и не разрушающиеся под действием природных ферментов, – не созданы до сих пор.

Однако, несмотря на все трудности, работу по созданию искусственных рибонуклеаз ученые не прекратили, начав с моделирования той самой РНКазы А. В лаборатории органического синтеза были синтезированы десятки потенциальных искусственных ферментов. Все они в той или иной степени расщепляли фосфодиэфирные связи в различных молекулах природной РНК, при этом совершенно не затрагивая ДНК. Каждая молекула этих синтетических ферментов была способна катализировать разрушение десятков и сотен связей в РНК.

Искусственные рибонуклеазы могут стать высокоизбирательными малотоксичными лекарственными препаратами для лечения вирусных, онкологических и наследственных заболеваний

Окончательно сказать, что структурно-функциональные аналоги РНКазы А созданы, ученые смогли после того, как детально исследовали особенности разрушения РНК в присутствии как природного, так и синтетических ферментов. Дело в том, что помимо высокой эффективности природным ферментам свойственна еще и высокая избирательность действия. Например, РНКаза А наиболее эффективно расщепляет связи в цепочке РНК между нуклеотидами аденином (А) и цитозином (С) и несколько хуже – между аденином и уридином (U). Так вот, оказалось, что искусственные ферменты работали практически также, как и природный.

Конечно, даже самые активные из созданных рибонуклеаз уступают по активности природному ферменту в сотни и даже тысячи раз. Однако если учесть, что РНКаза А ускоряет разрушение РНК в 1014 раз, то и полученные результаты выглядят впечатляюще. В то же время искусственные рибонуклеазы обладают рядом преимуществ: в первую очередь, они очень дешевы по сравнению с природными ферментами. Кроме того, эти соединения очень стабильны и могут работать в широком диапазоне условий.

Журнал «Здоровье ребенка» 5 (32) 2011

Введение

Представители группы эндонуклеаз — рибонуклеазы A (RNase-A) представляют большое семейство дивергентных протеинов, молекулы которых содержат специфические элементы гомологичных последовательностей аминокислот с уникальной дисульфидной третичной структурой. Эндонуклеазы RNase-A относятся к наиболее изученным белкам млекопитающих. Первый представитель данного семейства был выделен Renй Dubos в 1938 году из поджелудочной железы быка и определен как фермент, участвующий в процессе пищеварения [4, 8, 36, 37]. В последующем было показано, что RNase-A участвуют не только в процессах деградации РНК пищи в кишечном люмене, но и выполняют деполимеризацию РНК в тканях организма, регулируя процессы транскрипции и трансляции. В настоящее время у человека идентифицировано 13 представителей суперсемейства RNase-A. Гены всех членов суперсемейства RNase-A человека расположены на хромосоме 14 [31]. Многочисленные данные научных исследований значительно изменили представление о физиологическом значении этого протеинового суперсемейства. В частности было установлено, что представители RNase-A обладают цитотоксическим и антибактериальным свойствами [39], которые позволяют им участвовать в разнообразных физиологических процессах, в том числе в регуляции ангиогенеза, клеточного апоптоза, неспецифической защите респираторного тракта [2, 8, 15].

Краткая характеристика рибонуклеаз A

Рибонуклеазы A человека — суперсемейство, состоящее из 13 ферментов (12–16 кДа) (табл. 1) [10, 28, 32, 52].

В зависимости от наличия рибонуклеазной активности различают активные и неактивные RNase-A человека.

Активными являются восемь представителей суперсемейства RNase-A, молекулы которых имеют три специфических каталитических аминокислотных остатка: один — лизиновый в пределах консервативной последовательности CKXXNTF и два гистидиновых в N- и C-терминальных регионах, образующих каталитическую щель и определяющих рибонуклеазную активность. Молекулы семи зрелых представителей суперсемейства RNase-A содержат 8 цистеиновых остатков, которые образуют 4 дисульфидных мостика. Молекула ANG содержит 6 цистеиновых остатков. Форма молекул RNase-A напоминает почку (рис. 1, на примере RNASE1) [3, 4, 10, 44, 52].

Анализ филогенетических отношений членов суперсемейства RNase-A показал, что RNASE человека разделены на две группы — субсемейство активных (А) и субсемейство неактивных рибонуклеаз (HA) (рис. 2).

В свою очередь, активные RNase-A представляют две подгруппы, первая из которых включает RNASE1, участвующую в пищеварении, RNASE4, RNASE5, стимулирующую формирование сосудов и обладающую бактерицидным действием; вторая — два эозинофильных катионоактивных белка (RNASE2/эозинофильный нейротоксин, RNASE3/эозинофильный катионный белок) и RNASE6, RNASE7, RNASE8 [5, 21, 24, 27, 39, 40, 42, 47].

Неактивными являются пять представителей суперсемейства RNase-A человека — RNASE9, RNASE10, RNASE11, RNASE12, RNASE13, которые в процессе эволюции потеряли каталитические элементы [10, 28, 32].

Гены, кодирующие RNase-A, расположены на длинном плече хромосомы 14 [10, 28, 32, 55].

Показано, что в защите от инфекционных агентов, тропных к респираторному тракту, участвуют такие представители суперсемейства RNase-A, как RNASE2, RNASE3, RNASE7.

Основными продуцентами RNASE2, RNASE3 (рис. 3, 4) являются эозинофилы. Эти два представителя RNase-A входят в группу четырех основных эозинофильных протеинов, к которой также относятся эозинофильная пероксидаза (EPO) и главный базисный протеин (MBP) [7, 50]. Helene F. Rosenberg [39] считает, что гены RNASE2, RNASE3 возникли около 50 миллионов лет назад в результате процесса дупликации. Кроме эозинофилов, RNASE2 также продуцируют гепатоциты и нейтрофилы [41].

Молекула RNASE2 (молекулярная масса 15,5 кДа) состоит из 134 аминокислотных остатков. RNASE2 была идентифицирована в 1981 году как эозинофильный протеин, обладающий токсическим действием на клетки и вызывающий поражение мозжечка (феномен Гордона), в связи с чем получивший название «эозинофильный нейротоксин» (eosinophil-derived neurotoxin — EDN) [14]. RNASE3 (15,5 кДа) представляет собой аргининобогащенный (19 из 133 аминокислот) катионоактивный протеин [33]. Оба протеина близки по биохимическим характеристикам, но RNASE3 проявляет более выраженную противогельминтную активность [39]. В неактивном состоянии эозинофилов рибонуклеазы RNASE2, RNASE3 накапливаются в больших специфических цитоплазматических гранулах [41].

Протеин RNASE7 (14,5 кДа) был идентифицирован Jьrgen Harder и Jens-Michael Schrцder в 2002 году (рис. 5) [23]. Молекула RNASE7 обогащена лизиновыми остатками (18 из 128 аминокислот) [53]. Было показано, что RNASE7 продуцируется как кератиноцитами кожи, так и эпителиоцитами слизистой оболочки носовой полости, трахеи и бронхов. Для RNASE7 характерна конститутивная и индуцибельная продукция. Основными триггерами механизмов синтеза RNASE7 являются патоген-ассоциированные молекулярные структуры, IL-1b, IFN-g [11, 23].

Механизм действия рибонуклеаз A

Основной функцией RNase-A является деполимеризация рибонуклеиновых кислот путем гидролиза 3’,5’-фосфодиэфирных связей одноцепочечных РНК (оцРНК) при участии двух гистидиновых (His12 и His119) и одного лизинового остатка (Lis41), формирующих каталитическую щель [3, 12, 37, 43].

Благодаря каталитической активности представители суперсемейства RNase-A участвуют как в регуляции синтеза белка, предопределяя скорость гидролиза матричных РНК, защите макроорганизма от РНК-содержащих вирусов [39], так и в разнообразных физиологических и патологических процессах (табл. 2) [8, 15, 39].

Противоинфекционное действие RNASE2, RNASE3 и RNASE7

Практически с момента идентификации RNASE3 и RNASE7 было установлено, что они обладают бактерицидной активностью по отношению к грамотрицательным и грамположительным бактериям [1, 8, 53]. Показано, что RNASE3 подавляет рост колоний Staphylococcus aureus и Escherichia coli [23, 40]. RNASE7 характеризуется как очень мощной антибактериальной активностью, превосходящей по силе действия дефензины, против различных патогенных микроорганизмов, включая Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Enterococcus faecium, Propionibacterium acnes, так и противогрибковой активностью, в частности против Candida albicans [23, 53]. Jьrgen Harder и Jens-Michael Schrцder показали [23], что RNASE7 проявляет очень высокую бактерицидную активность против ванкомицинустойчивого Enterococcus faecium (LD90 < 0,03 микромоль), даже более выраженную, чем человеческий b-дефензин-3 (LD90 ~ 0,5 микромоль). По всей вероятности, RNASE3 играет существенную роль в процессе саногенеза острых инфекционных заболеваний респираторного тракта, вызванных бактериальными внутриклеточными инфекциями. Так, Chun-Jen Chen и соавт. [47] показали, что в сыворотке крови у детей, больных микоплазменной пневмонией, достоверно повышается концентрация RNASE3, достигая уровня 28,88 мкг/мл при норме 4,48 мкг/мл.

Молекулярные механизмы бактерицидного действия RNASE3 и RNASE7 остаются недостаточно ясными. В настоящее время существует несколько гипоз. Предполагают, что протеин RNASE3, дестабилизируя липидный слой мембран, организует поры в мембранах бактериальных клеток [51, 53] и активирует бактериальный аутолизис [22]. Yu-Chie Huang и соавт. [46] считают, что бактерицидное действие RNASE7 связано с литической активностью четырех специфически сгруппированных лизиновых остатков (Lys1, Lys3, Lys111, Lys112). Молекула RNASE7 может связываться катионоактивными аминокислотными остатками с отрицательно заряженными компонентами бактериальной мембраны и лизировать мембрану бактерии. Однако авторы не исключают возможности взаимодействия RNASE7 с RNASE7-связывающими протеинами бактериальной мембраны, которые представляют собой субъединицы мембранных пор бактерий. Данное взаимодействие приводит к открытию пор и фатальному высвобождению внутриклеточного содержимого микроорганизмов.

RNASE2 и RNASE3 обладают противовирусной активностью по отношению к респираторно-синцитиальному вирусу [13, 17, 41, 54]. Simon Phipps и соавт. [20] показали, что оцРНК респираторно-синцитиального вируса, являясь лигандом TLR7, индуцирует функциональную активность эозинофилов, в частности специфическую дегрануляцию, высвобождение рибонуклеаз, экспрессию фагоцитарного рецептора CD11b. Участие эозинофилов в процессе ответной реакции на инфекцию сопровождается более быстрой элиминацией вируса из организма. Также было продемонстрировано, что рекомбинантная RNASE2 снижает способность респираторно-синцитиального вируса проникать в эпителиальные клетки [38].

RNASE2 обладает противовирусной активностью и по отношению к вирусу иммунодефицита человека [30]. По всей вероятности, в основе противовирусного эффекта RNASE лежит не прямое протеолитическое действие рибонуклеазы на внеклеточные формы вириона, а взаимодействие RNASE и с клеткой-мишенью, и с вирусными поверхностными компонентами [55]. У RNASE7 не установлено противовирусного действия [53].

Иммуномодулирующее действие RNASE2

В настоящее время показано непосредственное влияние RNASE2 на иммунную систему. Так, установлено, что RNASE2 является исключительным хемоаттрактантом, обладающим высокоспецифическим действием на дендритные клетки (DC). RNASE2, прямо или косвенно взаимодействуя с неидентифицированным пертуссисчувствительным G-протеиновым рецептором, вызывает активацию p44/42 MAPK, обусловливая хемотаксис DC [18]. Сила хемотаксической активности RNASE2 сопоставима с эффектом стромального фактора роста 1a (stromal-derived growth factor — 1a/SDF-1a). RNASE2 предопределяет и созревание DC (CD34), которые ответственны за продукцию физиологически существенных объемов IL-6, регулятора активации нормальной Т-клеточной экспрессии и секреции (RANTES, CCL5), TNF-a, макрофагального хемоаттрактантного протеина 2 (MCP-2), макрофагального воспалительного протеина 1a (MIP-1a, CCL3) и интерферон-g-индуцируемого протеина 10 кДа (IP-10, CXCL10) [39]. Продемонстрировано, что RNASE2 является эндогенным лигандом TLR2, взаимодействие с которым приводит к активации адаптерной молекулы MyD88 и возбуждению внутриклеточных сигнальных путей. RNASE2 способствует индукции Th2-ответа [19, 39]. Некоторые исследователи не без основания относят RNASE2 к особой молекулярной группе, представители которой получили название смерть-ассоциированных молекулярных структур (damage-associated molecular pattern proteins — DAMP). Представители DAMP-группы участвуют в функционировании сигнальной системы раннего оповещения иммунной системы. При высвобождении из внутриклеточного пространства DAMP проявляют высокую провоспалительную или даже повреждающую активность [6, 34].

Участие RNASE3 в ремоделировании легочной ткани

RNASE3 стимулирует продукцию TGF-b1 фибробластами легочной ткани, предопределяя развитие фиброза [16]. В настоящее время остается неизученным вопрос, участвует ли катионоактивный протеин RNASE2, как RNASE3, EPO и MBP [35], в ремоделировании легочной ткани.

Заключение

Филогенетически древнейшее суперсемейство RNase-A, которое у человека организовано 13 представителями эндонуклеаз, участвует во множестве физиологических процессов организма, в том числе в регуляции транскрипции и трансляции, ангиогенеза, апоптоза клеток, неспецифической защите респираторного тракта и ремоделировании легочной ткани. RNASE3 и RNASE7 обладают выраженной бактерицидной активностью по отношению к грамотрицательным и грамположительным бактериям. RNASE3 играет существенную роль в процессе саногенеза острых инфекционных заболеваний респираторного тракта, вызванных бактериальными внутриклеточными инфекциями. RNASE2 и RNASE3 обладают противовирусной активностью по отношению к респираторно-синцитиальному вирусу. RNASE2 оказывает непосредственное влияние на иммунную систему, способствуя матурации и хемотаксису DC, а также индукции Th2-ответа. Разработка новых лекарственных средств на основе Rnase-A, которые в своем большинстве характеризуются высокой активностью и минимальной иммуногенностью, поможет разрешить многие противоинфекционные и онкологические проблемы [45]. В частности, в настоящее время для лечения злокачественной мезотелиомы и рака легкого проходит клинические испытания препарат Ranpirnase (Onconase), полученный на основе RNase лягушки (Rana pipiens) (ONC, Alfacell Inc, Нью-Джерси, США) [46].